蛋白銀染試劑盒說(shuō)明書
Protein Silver Stain Kit
蛋白銀染試劑盒
目錄號(hào)：K2012
保存條件：室溫保存。
組分說(shuō)明
Cat. No. K2012
Kit Size 20次
Silver Stain Sensitizer（500×） 2×1 ml
Silver Stain Enhancer 3ml
Silver Stain 2×250 ml
Silver Stain Developer 4×125 ml
產(chǎn)品簡(jiǎn)介
本試劑盒采用高靈敏度的銀染染料，可應(yīng)用于變性膠及非變性膠的蛋白染色，具
有目的條帶清晰、背景低，操作時(shí)間可靈活控制的優(yōu)點(diǎn)。另外，本試劑盒增加了一步
短時(shí)敏化作用步驟，可明顯降低背景及提升目的條帶的亮度。
注意事項(xiàng)
1．操作時(shí)請(qǐng)使用去離子水和潔凈的玻璃或塑料器皿，須戴一次性手套進(jìn)行操作。
2．整個(gè)銀染過(guò)程需在搖床上進(jìn)行，搖床轉(zhuǎn)速約60 rpm左右。
3．需自備乙醇，冰醋酸。
本產(chǎn)品僅供科研使用，請(qǐng)勿用于臨床診斷及其他用途
使用說(shuō)明
以下操作步驟中各溶液的用量以大小為8.5×5.5 cm、厚度為1.0 mm的凝膠為例，以凝膠全部浸沒(méi)到溶液為準(zhǔn)，一般用量25 ml。對(duì)于大型凝膠，各溶液的使用量需按凝膠體
積的比列放大。請(qǐng)?zhí)崆皽?zhǔn)備好50 ml固定液（超純水：乙醇：冰醋酸=6:3:1）、50 ml洗脫液（10%乙醇）和50 ml終止液（5%的冰醋酸）。
1．水洗：電泳完成后，用超純水洗膠2次，每次洗滌5分鐘。
2．固定：用25 ml固定液固定凝膠2次，每次固定15分鐘。
3．洗脫：固定完成后用洗脫液洗膠2次，每次洗滌5分鐘。
4．水洗：用超純水洗膠2次，每次洗滌5分鐘。
5．增敏：將上一步洗好的凝膠置于銀染增敏工作液中，室溫下準(zhǔn)確孵育1分鐘后用超純水洗膠3次，每次洗滌20秒。
銀染增敏工作液的配制：取50 µl Silver Stain Sensitizer（500×）加入到25 ml超純水中，混勻。
6．銀染：棄去超純水，將凝膠置于銀染工作液中孵育30分鐘。
銀染工作液的配制：取25ml Silver Stain加入50 µl Silver Stain Enhancer混勻。
7．水洗：用超純水快速洗膠2次，每次洗滌準(zhǔn)確控制為20秒。
8．顯影：立即將洗好的凝膠浸沒(méi)在顯影液中，室溫孵育2-3分鐘，直至蛋白條帶顯示清晰。
顯影液的配制：取25ml Silver Stain Developer加入30µl Silver Stain Enhancer混勻。
注意：顯影30秒內(nèi)，蛋白條帶開始顯現(xiàn)，繼續(xù)顯影至2-3分鐘。若蛋白條帶顯色較淺，可適當(dāng)延長(zhǎng)顯影時(shí)間至5分鐘及以上。
9．終止：用終止液洗去凝膠上的顯影液后，將凝膠浸泡在新的終止液中反應(yīng)10分鐘。
實(shí)驗(yàn)代做服務(wù)：
實(shí)驗(yàn)室代做實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目
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| 染色質(zhì)免疫沉淀分析(CLIP)實(shí)驗(yàn)服務(wù)
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